產(chǎn)品名稱：人花生四烯酸（AA）ELISA檢測試劑盒

貨號：XTY16048

規(guī)格：48T/96T

儲存條件：2-8℃

有效期：6個月

用途：僅供科研使用，定量檢測血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液中花生四烯酸（AA）的濃度。

【檢驗原理】

本試劑盒采用競爭法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。在預包被抗花生四烯酸（AA）抗體（固相抗體）的微孔酶標板中，加入人 花生四烯酸（AA）校準品和待測樣本，再加入HRP標記的人 花生四烯酸（AA）抗原（酶標抗原），經(jīng)過溫育與充分洗滌，去除未結合的組分，在微孔板固相表面形成固相抗體-酶標抗原的免疫復合物。加底物A和B，底物在HRP催化下，產(chǎn)生藍色產(chǎn)物，在終止液（不含硫酸）作用下，最終轉化為黃色，在酶標儀450nm波長上測定吸光度（OD值），吸光度（OD值）與待測樣品中人 花生四烯酸（AA）的濃度負相關。擬合校準品曲線，可以計算出樣本中人 花生四烯酸（AA）的濃度。

【產(chǎn)品性能指標】

1.外觀和物理檢查:試劑盒應組分齊全，內(nèi)外包裝均應完整，標簽清晰，液體試劑無滲漏。各組分裝量不少于表1中要求。

2.線性: 用四參數(shù)Logistic曲線擬合（4-pl），在30 μg/mL – 480 μg/mL范圍內(nèi)，劑量-反應曲線相關系數(shù)（r）的絕對值應不低于0.9900。

3.精密度

3.1分析內(nèi)精密度:試劑盒質控品測定結果的變異系數(shù)（CV）應不大于15.0%。

3.2批間精密度:在三個不同批次產(chǎn)品之間，質控品測定結果的變異系數(shù)（CV）應不大于15.0%

4.最-低檢出限:最-低檢測濃度小于1.0 μg/mL。

5.質控品測定值: 每次檢測結果均應在允許范圍內(nèi)。

【樣本要求】

  樣本類型和采集

以下只是列出樣品采集的一般指南。所有樣本采集過程中，不得使用疊氮鈉做為防腐劑。

1、細胞培養(yǎng)上清：4000rpm條件下離心20min，去除細胞顆粒和聚合物，上清液保存在- 20℃以下，避免反復凍融。

2、血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，4000rpm條件下離心20min，小心地分離出血清，保存在- 20℃以下，避免反復凍融。

3、血漿：肝素，EDTA，或檸檬酸鈉作為抗凝劑。在4000rpm條件下，離心20分鐘取上清，血漿保存在-20℃以下，避免反復凍融。

4、組織勻漿：用預冷的PBS (0.01 M,pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液，稱重后將組-織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1: 9的重量體積比，比如1g的組織樣品對應9 mL的PBS，具體體積可根據(jù)實驗需要適當調整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中，在冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞，可以對勻漿液進行超聲破碎或反復凍融。最后將勻漿液5000×g離心 5-10分鐘，取上清檢測。

人花生四烯酸（AA）ELISA檢測試劑盒