菌落總數(shù)質(zhì)控樣品使用注意事項(xiàng)

西林瓶菌種打管復(fù)活操作步驟
1、用 75%酒精棉擦拭西林瓶表面進(jìn)行消毒。
2、在生物安全柜中打開(kāi)鋁制瓶蓋和膠蓋。
3、用無(wú)菌吸管吸取 0.5ml 左右液體培養(yǎng)基（《菌種說(shuō)明書》中固體培養(yǎng)基去掉瓊脂即可)于西
林瓶中將凍干菌粉全部溶解。
4、將溶解后的菌懸液轉(zhuǎn)移至盛有 4~5mL 液體培養(yǎng)基的試管中混勻，可將殘留在吸管中的 1-2
滴菌懸液轉(zhuǎn)接至固體培養(yǎng)基上。
5、將液體試管和斜面試管于條件下靜置培養(yǎng)，以液體培養(yǎng)結(jié)果為準(zhǔn)。

甘油凍存管菌種打管復(fù)活操作步驟
1、準(zhǔn)備好的菌種培養(yǎng)基（見(jiàn)《菌種說(shuō)明書》）。
2、將凍存管下半部浸入 37℃溫水中輕輕搖動(dòng)，使冷凍狀態(tài)的菌種懸液迅速融化。如果收到菌
種凍存管時(shí)菌懸液是融化狀態(tài)則需要立即進(jìn)行轉(zhuǎn)接培養(yǎng)。
3、用 75%酒精棉擦拭凍存管表面進(jìn)行消毒。
4、在生物安全柜中打開(kāi)凍存管瓶蓋，用無(wú)菌吸管吸取全部菌懸液，均勻涂布到 2 支試管斜面
或平板上。
5、將斜面試管或平板于條件下靜置培養(yǎng)。對(duì)于生長(zhǎng)緩慢的菌種應(yīng)持續(xù)培養(yǎng) 2 周至更長(zhǎng)的
時(shí)間。

注意事項(xiàng)
1、 所有打管操作都需要無(wú)菌操作。需由專業(yè)微生物技術(shù)人員在相應(yīng)防護(hù)設(shè)備中進(jìn)行，生物危
害程度為三類的菌種應(yīng)在生物安全柜中操作。
2、 西林瓶和凍存管打開(kāi)后需一次用完，不能留存。
3、 菌種經(jīng)過(guò)凍干保藏后，處于休眠狀態(tài)，需要轉(zhuǎn)接 2-3 代恢復(fù)活力。
4、 大部分凍干菌種會(huì)在培養(yǎng)幾天后生長(zhǎng)。有些菌種第一代恢復(fù)生長(zhǎng)時(shí)會(huì)有較長(zhǎng)的延遲期，培
養(yǎng)此類菌種時(shí)需要將培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng)至正常培養(yǎng)時(shí)間的雙倍時(shí)長(zhǎng)，甚至 2 周至更長(zhǎng)的時(shí)間。